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La filtración por flujo tangencial (TFF) es una técnica que separa y concentra exosomas haciendo circular el líquido de forma paralela a una membrana con poros de tamaño definido. Las moléculas pequeñas atraviesan la membrana y las vesículas quedan retenidas sin someterse a las fuerzas intensas de la ultracentrifugación. Es un método escalable, utilizado en bioprocesos, que ayuda a obtener lotes más uniformes.
La filtración por flujo tangencial (TFF) es una técnica de laboratorio para separar, purificar y concentrar exosomas del líquido en el que se producen. Su nombre se debe a que el líquido circula paralelo (tangencial) a la membrana filtrante, en lugar de empujarse directamente contra ella.
¿Cómo funciona la TFF?
Las células mesenquimales en cultivo liberan exosomas al medio que las rodea. Ese medio contiene también proteínas sueltas, restos celulares y otras partículas. En la TFF:
- El líquido se hace circular a lo largo de una membrana con poros de tamaño definido.
- Las moléculas más pequeñas y el exceso de líquido atraviesan la membrana.
- Las vesículas de mayor tamaño quedan retenidas y se van concentrando.
- Combinando membranas y pasos de lavado se puede seleccionar un rango de tamaño de partículas.
Como el flujo "barre" continuamente la superficie, la membrana se tapa menos que en una filtración convencional.
¿Qué ventajas tiene frente a otros métodos?
La ultracentrifugación, el método clásico, somete las muestras a fuerzas muy intensas que pueden dañar o agrupar las vesículas. La TFF:
- Es un proceso más suave para las vesículas.
- Permite procesar volúmenes grandes de forma reproducible.
- Facilita obtener lotes más homogéneos, algo importante en bioprocesos de uso clínico.
Ningún método es perfecto: con frecuencia la TFF se combina con otras técnicas y siempre debe acompañarse de una caracterización del producto final, como recomiendan las guías MISEV. Lo explicamos en cómo se evalúa la calidad de los exosomas.
¿Por qué te interesa como paciente?
El método de purificación influye en la pureza y consistencia de lo que se aplica. Los exosomas EXOCORD® que utiliza Longevity Clinic se purifican mediante ultrafiltración por flujo tangencial con el sistema Cogent® de Merck, con selección de diámetro de 50 a 150 nm; puedes ver más en la página de exosomas y en nuestra tecnología. Un buen proceso de purificación no asegura un resultado clínico, pero es parte de la trazabilidad de un producto biológico.
Fuentes y bibliografía
- Busatto S, et al. Tangential flow filtration for highly efficient concentration of extracellular vesicles from large volumes of fluid. Cells, 2018.
- Théry C, et al. Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (MISEV2018): a position statement of the International Society for Extracellular Vesicles. Journal of Extracellular Vesicles, 2018.
- Welsh JA, et al. Minimal information for studies of extracellular vesicles (MISEV2023): From basic to advanced approaches. Journal of Extracellular Vesicles, 2024.